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发布时间：2023-05-01
收藏适用场景： 基因功能研究
解决的技术问题： 依赖于慢病毒载体的Tet-On体系还不够完善，这是因为源于慢病毒载体的LTR启动子/增强子会造成表达泄露现象，尤其是在构建同一载体共表达诱导基因和rtTA时，更需要优化最佳组合方式。
说明书概要： 本发明公开一种四环素慢病毒诱导表达载体及其建立方法和应用，所述四环素慢病毒诱导表达载体包含目的基因表达框和反义四环素转录激活因子表达框；诱导型CRISPR/Cas9系统将Cas9蛋白置于诱导型启动子的下游，并将U6启动表达的sgRNA序列置于整个四环素诱导体系的上游。本发明首次提出TRE3Gp与TetON3G的组合效果最佳，该诱导体系引入细胞后可在保持低背景表达的同时，最大水平的诱导表达目的基因。该诱导系统对诱导剂反应灵敏、效率高、分子量小，可广泛应用于基因功能研究中。
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