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发布时间:2023-05-01
适用场景: 降尿酸药物
解决的技术问题: 现存的动物模型也有许多不完善的地方,如操作复杂,实验周期长,给痛风研究带来了极大的不便,并且常用的造模动物如小鼠、大鼠等虽与人类同属哺乳动物,但分类地位相差较远,属于低等啮齿类动物,解剖和生理与人相差较远,其动物模型得到的数据参考性也有一定的局限性。
说明书概要: 本发明公开了一种高尿酸血症肝细胞模型及其构建方法。构建方法包括如下步骤:(1)将处于对数生长期的肝细胞(LO2)经胰蛋白酶消化后,制成细胞悬液,血球计数板计数后,将肝细胞稀释为104‑106个/mL,铺板后,置于37°C、5%(V/V)CO2细胞培养箱中培养;(2)12‑24 h后,取出孔板,加入用量为0.5‑2 mmol/L的腺苷的溶液,继续孵育12‑24 h;(3)每孔中加入0.2‑0.4 IU黄嘌呤氧化酶,继续孵育12‑24 h,即得到高尿酸血症细胞模型。实验结果表明细胞铺板最佳密度为106个/mL,诱导物腺苷最佳用量为1.5 mmol/L。得到的高尿酸血症肝细胞模型可用于筛选降尿酸药物,相对于高尿酸血症动物模型操作简单,所需时间较短,效率高。
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